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目前，菌肥中所用的菌種一般屬于中溫性微生物，土壤溫度在25-37℃時，利于菌的生長和繁殖，一旦土壤溫度超過37℃，菌的生長會明顯變緩甚至停滯，菌肥效果也將受到影響。但生長停滯不代表菌的死亡，當溫度正常恢復且土壤濕度在50%左右時，菌將恢復生長及繁殖功能。如果在高溫地區施用菌肥，建議企業通過分離篩選出更耐高溫的菌種，添加到菌肥中確保菌肥效果。
此外，強降雨也會讓菌肥效果降低。大多數微生物菌肥中的菌都是有氧細菌，需要有氧呼吸。如果土壤積水時間過長，會影響菌肥效果，必須及時排干積水。此外，過多的積水會讓菌懸浮到水中一部分，被沖掉，從而影響菌肥效果。
下面列舉幾點注意事項：
注意1：氮、磷、鉀總含量超過8%時與菌混合，會抑制菌的活性。陶樹興告訴記者，菌與化肥混合時，一定要注意肥料中的氮、磷、鉀總養分不要超過8%，一旦超過會抑制菌的活性，如果氮、磷、鉀總養分大于8%，建議隨用隨混。目前，有些廠家的復合微生物菌肥中的氮、磷、鉀總養分達到10%以上，有的甚至達到25%以上，這對于一般的菌種來說，都會造成菌活性降低甚至造成部分死亡。但如果廠家選用的是耐化肥的菌種，就可以保證菌肥肥效。
注意2：不要將菌肥與殺菌劑、殺蟲劑、除草劑和含硫的化肥(如硫酸鉀等)以及稻草灰混合用。因為這些藥、肥，很容易殺死生物菌。或者先施菌肥，隔48小時后，再打藥除草。若拌種，切忌和已拌好殺菌劑的種子混合使用。還應防止與未腐熟的農家肥混肥。
注意3：對于已多年施用化肥的田塊，施用生物菌肥時不能大量減少化肥和有機肥的施用量，因農作物對化肥產生了依賴性，用生物菌肥取代化肥不能一下子適應。因此，其取代量應做到 、第二、第三年分別取代30%、40%和60%，磷、鉀肥只能補足，不能減少。
注意4：在施用方法上，建議采用溝施、窩施的方式，一定要將菌肥蓋在土壤里，避免陽光直射，紫外線會殺死細菌；此外，不建議沖施微生物菌肥，因為加水稀釋后菌群會被沖散，影響施用后的效果。對含硫高的土壤和銹水田，不宜施用生物菌肥，因為硫能殺死生物菌。對于翻漿的水田，一般不用撒施，用噴霧的方法效果會好些。
注意5：高溫過高、過低、干旱條件下的農作物田塊不建議施用微生物菌肥。
注意6：選擇微生物菌肥一定要根據作物進行選擇。例如，針對大田作物，如水稻、玉米、小麥等，建議選擇復合微生物肥料。因為復合微生物肥料中既包含了菌、又包含氮、磷、鉀養分，以及有機質，使用起來更方便；在單獨使用氮肥、磷肥或鉀肥的地塊，可以配合施用微生物菌劑，起到促生長、抗病抗蟲等作用；針對瓜果蔬菜，建議使用生物有機肥，改善瓜果蔬菜的口感和品質。
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